Amidase (AMD)
इन्जाइमहरू:macromolecular जैविक उत्प्रेरक हो, अधिकांश इन्जाइमहरू प्रोटीन हुन्
Amidase:फ्री एसिड र अमोनियाको उत्पादनको साथ एसाइल समूहलाई पानीमा स्थानान्तरण गरेर विभिन्न अन्तर्जात र विदेशी एलिफ्याटिक र एरोमेटिक एमाइडहरूको हाइड्रोलाइसिसलाई उत्प्रेरित गर्नुहोस्।हाइड्रोक्सामिक एसिड र अन्य जैविक एसिडहरू व्यापक रूपमा औषधिको रूपमा प्रयोग गरिन्छ किनभने तिनीहरू वृद्धि कारकहरू, एन्टिबायोटिकहरू र ट्युमर अवरोधकहरू हुन्।उत्प्रेरक स्टेरियोसेलेक्टिविटी अनुसार एमिडेसहरूलाई आर प्रकार र एस प्रकारको एसाइलेसहरूमा विभाजन गर्न सकिन्छ।
एमाइड्सको हाइड्रोलाइसिसलाई उत्प्रेरित गर्नुको अतिरिक्त, एमिडेसले हाइड्रोक्सीलामाइन जस्ता सह-सब्सट्रेटहरूको उपस्थितिमा एसाइल स्थानान्तरण प्रतिक्रियाहरूलाई पनि उत्प्रेरित गर्न सक्छ।
विभिन्न स्रोतहरू भएका एमिडेसको सब्सट्रेट विशिष्टता फरक-फरक हुन्छ, तिनीहरूमध्ये केहीले मात्र सुगन्धित अमाइडहरू हाइड्रोलाइज गर्न सक्छन्, तिनीहरूमध्ये केहीले मात्र एलिफेटिक एमाइडहरू हाइड्रोलाइज गर्न सक्छन्, र केहीले α-वा ω-एमिनो एमाइडहरू हाइड्रोलाइज गर्न सक्छन्।धेरै जसो एमाइनहरूमा एसाइक्लिक वा साधारण एरोमेटिक एमाइडहरूका लागि मात्र राम्रो उत्प्रेरक गतिविधि हुन्छ, तर जटिल एरोमेटिक्सका लागि, हेटेरोसाइक्लिक एमाइडहरू, विशेष गरी ओर्थो सब्स्टिट्युन्टहरू भएका एमाइडहरू, गतिविधिमा कम हुन्छन् (केवल केही इन्जाइमहरूले राम्रो उत्प्रेरक प्रभावहरू प्रदर्शन गर्छन्)।
उत्प्रेरक संयन्त्र:
| इन्जाइमहरू | उत्पादन कोड | उत्पादन कोड |
| इन्जाइम पाउडर | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | 19 amidases को एक सेट, 50 mg प्रत्येक 19 वस्तु * 50mg / वस्तु, वा अन्य मात्रा |
| स्क्रिनिङ किट (SynKit) | ES-AMD-1900 | 19 amidases को एक सेट, 1 मिलीग्राम प्रत्येक 19 वस्तुहरू * 1mg / वस्तु |
★ उच्च सब्सट्रेट विशिष्टता।
★ बलियो chiral चयनशीलता।
★ उच्च रूपान्तरण दक्षता।
★ कम उप-उत्पादनहरू।
★ हल्का प्रतिक्रिया अवस्था।
★ वातावरण मैत्री।
➢ सब्सट्रेट विशिष्टताको कारणले विशिष्ट सब्सट्रेटहरूको लागि इन्जाइम स्क्रीनिंग गरिनुपर्छ, र उत्कृष्ट उत्प्रेरक प्रभावको साथ लक्ष्य सब्सट्रेटलाई उत्प्रेरित गर्ने इन्जाइम पाउनुहोस्।
➢ चरम अवस्थाहरूसँग कहिल्यै सम्पर्क नगर्नुहोस् जस्तै: उच्च तापक्रम, उच्च/कम pH र उच्च एकाग्रता संग जैविक विलायक।
➢ सामान्यतया, प्रतिक्रिया प्रणालीमा सब्सट्रेट, बफर समाधान (इन्जाइमको इष्टतम प्रतिक्रिया pH) समावेश हुनुपर्छ।सह-सब्सट्रेटहरू जस्तै हाइड्रोक्सिलामाइन एसिल ट्रान्सफर प्रतिक्रिया प्रणालीमा उपस्थिति हुनुपर्छ।
➢ एएमडीलाई इष्टतम प्रतिक्रिया pH र तापमानको साथ प्रतिक्रिया प्रणालीमा अन्तिममा थपिनुपर्छ।
➢ सबै प्रकारका AMD मा विभिन्न इष्टतम प्रतिक्रिया अवस्थाहरू छन्, त्यसैले तिनीहरू प्रत्येकलाई व्यक्तिगत रूपमा थप अध्ययन गर्नुपर्छ।
उदाहरण १(१):
विभिन्न एमाइड सब्सट्रेटहरूमा हाइड्रोलिसिस गतिविधि
| सब्सट्रेट | विशिष्ट गतिविधि μmols मिनेट-1mg-1 | सब्सट्रेट | विशिष्ट गतिविधि μmols मिनेट-1mg-1 |
| एसिटामाइड | ३.८ | ο-ओह बेन्जामाइड | १.४ |
| प्रोपियोनामाइड | ३.९ | p-ओह बेन्जामाइड | १.२ |
| ल्याक्टमाइड | १२.८ | ο-एनएच2बेन्जामाइड | १.० |
| Butyramide | ११.९ | p-एनएच2बेन्जामाइड | ०.८ |
| Isobutyramide | २६.२ | ο- टोलुअमाइड | ०.३ |
| पेन्टानामाइड | २२.० | p- टोलुअमाइड | ८.१ |
| हेक्सानामाइड | ६.४ | निकोटीनामाइड | १.७ |
| साइक्लोहेक्सानामाइड | १९.५ | आइसोनिकोटिनमाइड | १.८ |
| Acrylamide | १०.२ | पिकोलिनामाइड | २.१ |
| Metacrylamide | ३.५ | 3-फेनिलप्रोपियोनामाइड | ७.६ |
| प्रोलिनामाइड | ३.४ | Indol-3-acetamide | १.९ |
| बेन्जामाइड | ६.८ |
प्रतिक्रिया 50mM सोडियम फस्फेट बफर समाधान, pH 7.5, 70 ℃ मा गरिएको थियो।
| एमाइड्स | Hydroxylamine | हाइड्राजिन |
| एसिटामाइड | ८.४ | १.४ |
| प्रोपियोनामाइड | १८.४ | ३.० |
| Isobutyramide | २५.० | २२.७ |
| बेन्जामाइड | ९.२ | ६.१ |
प्रतिक्रिया 50mM सोडियम फस्फेट बफर समाधान, pH 7.5, 70 ℃ मा गरिएको थियो।
सम्बन्धित अभिकर्मक एकाग्रता: एमाइड्स, 100 मिमी (बेन्जामाइड, 10 मिमी);hydroxylamine र hydrazine, 400 मिमी;इन्जाइम 0.9 μM।
उदाहरण २(२):
उदाहरण ३(३):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al।Extremophiles, 2001, 5:183-192।
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al।प्रक्रिया बायोकेमिस्ट्री, 2015, 50(8): 1400-1404।
3. Zheng RC, जिन JQ, Wu ZM, et al।जैविक रसायन विज्ञान, २०१७, अनलाइन उपलब्ध ७.
